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TRABAJO ORIGINAL
Uso de la técnica de
hibridación fluorescente in situ para la identificación
rápida de staphylococcus aureus en hemocultivos
Use of the fluorescent in situ hybridization technique
for the rapid identification of staphylococcus aureus in
blood cultures
Maria L. Cómito (1),
Mario Vilaró (1),
Eduardo Cuestas (2),
Eduardo Moscone (3).
Revista Facultad de Ciencias
Medicas 2009; 66(4): 140-145
(1)Laboratorio de Microbiología,
Hospital Privado Centro Médico de Córdoba;
(2) Área de Epidemiología
Clínica y Bioestadística Hospital Privado Centro Médico de
Córdoba, Av. Naciones Unidas 346. X5016KEH, email:
lucrecom@hotmail.com;
(3) Instituto Multidisciplinario
de Biología Vegetal, Universidad Nacional de Córdoba
Realizado con el apoyo del Instituto Multidisciplinario de
Biología Vegetal, Universidad Nacional de Córdoba.
Resumen
Antecedentes: La técnica de referencia para la detección de
bacteriemias es el hemocultivo. Uno de los gérmenes que
causa bacteriemias con mayor frecuencia es Staphylococcus
aureus (SAU). La presencia de cocos Gram positivos en
racimos (CGPR) en un hemocultivo es sugestiva de
bacteriemia, aunque la relevancia del hallazgo depende de la
identificación correcta del microorganismo. La tipificación
definitiva demanda entre 24 y 48 hs. La técnica de
hibridación fluorescente in situ (FISH), es un método rápido
para la identificación de bacterias en hemocultivos.
Objetivos: El objetivo de este trabajo fue poner a punto la
técnica de FISH dirigido al ARN 16s de SAU, en muestras de
hemocultivos con CGPR a la coloración de Gram, determinar la
concordancia con el método de referencia y la factibilidad
de implementarlo en la rutina del laboratorio de
Microbiología. Material y métodos: Se incluyeron los
hemocultivos estudiados en el Laboratorio de Microbiología
del Hospital Privado de Córdoba, entre el 1/01/09 y
31/12/09. A cada hemocultivo positivo que mostró CGPR se les
realizó simultáneamente identificación microbiológica
bioquímica y FISH. Resultados: Sobre 496 positivas 32
mostraron CGPR y 24 se identificaron como SAU. Se observó
una concordancia de 100% (IC95% 99 a 100) entre ambos
métodos diagnósticos, con un valor de κ <0,01. Discusión:
Las excelente concordancia obtenida abre la puerta a un
estudio para determinar el valor predictivo de FISH, su
sensibilidad y especificidad; y evaluar el impacto clínico
de su incorporación a un laboratorio de bacteriología
clínica.
Palabras Clave: hemocultivos, bacteriemia,
Staphylococcus, identificación rápida, FISH.
Abstract
Background: The technique of reference for the detection of
bacteriemia is the blood culture. One of the most frequent
bacteria responsible of bacteriemia is Staphylococcus aureus
(SAU). The presence of Gram positive cocci (CGPR), in blood
culture give the suspicious of bacteriemia, although the
relevance of the finding depends on the correct
identification of the microorganism. The definitive
typification it demands from 24 to 48 hours. The technique
of fluorescent in situ hybridization (FISH), is a rapid
method for the identification of bacteria in blood culture.
Aims: The aims of this work was to establish the FISH
technique directed to the 16S RNA of SAU in samples of blood
cultures with CGPR to the Gram staining, to determine the
concordance with the method of reference, and to evaluate
the possibility to use as standard method in the laboratory
of microbiology. Material and Methods: The blood cultures
analyzed in the Laboratory of Microbiology of the Hospital
Privado Cordoba from 01.01.2009 to 31.12.09 were included in
this study. To each positive blood culture which showed CGPR
was applied simultaneously biochemical identification and
FISH. Results: From 496 positive samples, 32 showed CGPR, 24
of them were identified as SAU. A concordance of 100% (IC95%
99 to 100) between both methods of diagnosis, with a value
of k<0.01 was observed. Discussion: The excellent
concordance opens the prospect for a study in order to
determine the predictive value of FISH, its sensibility and
specificity. Furthermore, it will be possible to evaluate
its clinical impact being incorporated in a laboratory of
clinical bacteriology.
Key words: blood cultures, bacteriemia,
Staphylococcus, rapid identification, FISH
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2009
Volumen 66 n° 4
Comito ML
